ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)如何應(yīng)對(duì)？上海恒遠(yuǎn)有妙招以下山大對(duì)策解決ELISA實(shí)驗(yàn)
1、樣品采集：全血9份2%EDTA-Na2 1份（或3.8%枸櫞酸鈉1份）抗凝，1500rpm離心10min，以分離血漿。血管內(nèi)皮細(xì)胞樣品，收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液或細(xì)胞溶解物上清液。尿液檢測(cè)取24h尿或早晨*次尿液。
2、將200μl抗人TM單抗包被液加入聚苯乙烯放免小杯，4℃隔夜，用洗滌液A洗3次。將待測(cè)樣品（或TM標(biāo)準(zhǔn)液）0.25ml與等量緩沖液A混合，每小杯加入200μl稀釋樣品液（空白管加入200μl緩沖液A），37℃水浴2h，用洗滌液A洗3次，加入200μl125I-抗人TM單抗，37℃水浴2h，再用洗滌液B洗6次，γ計(jì)算儀測(cè)放射活性。
3、結(jié)果結(jié)算：1.以正常人混合血漿（或尿液）TM含量為100%，計(jì)算待測(cè)樣品TM：Ag百分率。2.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：人TM標(biāo)準(zhǔn)品用緩沖液A作倍比稀釋，TM濃度分別為500ng/mL、250ng/mL、125ng/mL、62.5ng/mL、31.25ng/mL、15.6ng/mL、7.8ng/mL、3.9ng/mL、和0ng/mL，然后同上述方法測(cè)TM含量，以人TM濃度為橫坐標(biāo)，以每分鐘的放射性脈沖數(shù)為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，或計(jì)算出直線回歸方程。
恒遠(yuǎn)與客戶問答集錦
客戶問：是不是空白對(duì)照就是什么都不加？
恒遠(yuǎn)答：不加樣本 不加樣本稀釋液 不加酶標(biāo)試劑 其他的都可以加。
客戶問：樣本稀釋液是配好的嗎？
恒遠(yuǎn)答：樣本稀釋液是配好的。
客戶問：樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎？
恒遠(yuǎn)答：可以的，直接加40μl就可以了。
客戶問：人和肽素（copeptin）ELISA試劑盒檢測(cè)的時(shí)候需要在操靜臺(tái)中操作嗎，還是在外面操作就可以了，謝謝
恒遠(yuǎn)答：要求不是很嚴(yán)格，根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備而定，都可以。
客戶問：人和肽素（copeptin）ELISA洗滌液是濃縮的；是一次配好，還是現(xiàn)配現(xiàn)用？
恒遠(yuǎn)答：濃縮的，現(xiàn)配現(xiàn)用的。
客戶問：elisa方法的不測(cè)人血小板第四因子里IgG抗體的滴度嗎？
恒遠(yuǎn)答：ELISA不測(cè)滴度的，熒光法可以測(cè)。
客戶問：酶標(biāo)板不平，影響結(jié)果嗎？
恒遠(yuǎn)答：不影響結(jié)果。
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