血清、血漿只有一字之差,但是用途和實驗效果確實差了十萬八千里。了解清楚什么是血清血漿,在做實驗的時候也就清楚明了多了。首先,我們要了解什么是血清、血漿。
血清
血液凝結(jié)分出的淡黃色通明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反響被激活,血液迅速凝結(jié),構(gòu)成膠凍。其周圍所分出之淡黃色通明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心獲得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿zui大的差異。而在凝血反響中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了改變。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生改變,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清寄存時刻逐步減少以致消失。這些也都是與血漿差異之處。但很多未參與凝血反響的物質(zhì)則與血漿根本相同。為防止抗凝劑的攪擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。
血漿
相當于結(jié)締組織的細胞間質(zhì)。是血液的重要組成部分,呈淡黃色液體。血漿的無機鹽主要以離子狀況存在,正負離子總量持平,堅持電中性。這些離子在維持血漿晶體滲透壓、酸堿平衡、以及神經(jīng)-肌肉的正常興奮性等方面起著重要作用。血漿的各種化學成分常在必定規(guī)模內(nèi)不斷地改變,其間以葡萄糖、蛋白質(zhì)、脂肪和激素等的濃度zui易受營養(yǎng)狀況和機體活動狀況的影響,而無機鹽濃度的改變規(guī)模較小。血漿的理化特性相對恒定是內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的首要體現(xiàn)。
其次,血清和血漿有以下三點區(qū)別:
1、血清中沒有纖維蛋白原
2、血清中無參與凝血中的血漿蛋白
3、血漿無一些凝血過程中血小板釋放的物質(zhì)
在藥代研究中兩者各有優(yōu)缺點:
1、血漿中含有抗凝物質(zhì)(肝素或EDTA),可能會干擾化合物的檢測(結(jié)合等),血清則無
2、血漿中蛋白稍多,可能會在SPE中產(chǎn)生諸如堵柱子等情況,干擾樣本制備過程(這一點其實差別不明顯)
3、血漿制備快速,直接低溫或常溫離心后即可分離,血清制備耗時較長。這一點對藥代試驗影響較大,因為給藥后4小時內(nèi)一般取血點都較為密集
4、血清的凝血過程可能會因為與藥產(chǎn)生吸附作用,從而減少血清的含量,并且有可能造成不平行。
再次,血清與血漿的收集方法也是不同的,血清血漿的收集方法如下:
1. 血清:
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保 存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇 EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心 20 分 鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
綜上,我們在判定指標檢測可以選擇適用血清或者血漿,比如,檢測凝血功能選擇血漿,免疫類指標適用于血清。對于其他類型指標包含細胞因子的變化,都可以選擇。血清和血漿都有各自的優(yōu)點和缺點。
那么我們也就知道血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。所以科研人員選擇用牛血清做細胞實驗的理由也就有如下幾點:
1、牛血清是細胞培養(yǎng)基中的中藥成份之一。在培養(yǎng)基中加入適量血清(10%),首先可以補充細胞生長所需的生長因子、激素、帖附因子等。
2、具有解毒作用,能解除脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。
3、它還能中止胰酶的作用,并保護細胞免受機械損傷等。但是血清成分復(fù)雜,不同來源、不同批號生產(chǎn)的血清對細胞生長作用的差異較大。血清的保存期只有一年,不同存放時期的血清的效力也不同。所以,當新購得的血清或要在開始一個重大試驗的時候,應(yīng)首先進行牛血清的篩選。